[摘要] 目的 觀察分析细针穿刺细胞学检查联合免疫组化对甲状腺癌的术前诊断准确率的影响。 方法 回顾性分析2015年1月～2016年12月于我院就诊的甲状腺结节患者86例的临床资料，术前均进行细胞学检查，同时进行免疫组化分析，并与术后病理结果进行对比。 结果 术前细胞学诊断38例乳头状癌，18例滤泡性肿瘤，16例滤泡性病变，2例未分化癌。18例可疑恶性肿瘤患者采用免疫组化染色，其中7例乳头状癌，2例滤泡癌；术后病理结果：9例乳头癌，2例滤泡癌。16例可疑良性病变采用免疫组化染色，其中9例恶性肿瘤，术后病理结果得知，5例乳头癌，2例滤泡癌。术后病理检查得知，48例乳头癌，4例滤泡癌，9例未分化癌，25例结节性甲状腺肿。单个免疫组化标记物抗体Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO与联合标记在甲状腺癌诊断中的敏感性、准确性、特异性均较高；但与联合标记对比差异无统计学意义（P>0.05）；细胞学检查联合免疫组化对诊断甲状腺结节的敏感性、准确性、特异性均显著高于细胞学检查（P<0.05）。 结论 细针穿刺细胞学检查联合免疫组化能够有效提高甲状腺癌诊断准确性，可有效减少甲状腺癌的误诊与漏诊，有利于临床治疗与预后。
[关键词] 细胞学检查；免疫组化；甲状腺癌；术前诊断
[中图分类号] R736.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）09-0130-03
Effect of fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry on the accuracy of preoperative diagnosis of thyroid cancer
PEI Zhijuan
Department of Pathology， Zhejiang Cancer Hospital， Hangzhou 310022， China
[Abstract] Objective To investigate the effect of fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry on the accuracy of preoperative diagnosis of thyroid cancer. Methods The clinical data of 86 patients with thyroid nodules who were treated in our hospital from January 2015 to December 2016 were retrospectively analyzed. Cytology was performed on all participants before operation with immunohistochemical analysis conducted at the same time. The results were compared with postoperative pathological findings. Results 38 cases of papillary carcinoma， 18 cases of follicular tumor， 16 cases of follicular lesion and 2 cases of undifferentiated carcinoma were diagnosed using preoperative cytology. Immunohistochemical staining was used in 18 cases of suspected malignant tumor with 7 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma as a result. Postoperative pathology showed that， there were 9 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma. 16 cases of suspected benign lesions were immunohistochemistry， with 9 cases of malignant tumors as a results， while postoperative pathology found 5 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma. Postoperative pathological examination found 48 cases of papillary carcinoma， 4 cases of follicular carcinoma， 9 cases of undifferentiated carcinoma and 25 cases of nodular goiter. The sensitivity， accuracy and specificity of single immunohistochemical antibody such as Galectin-3， CK19， BRAF， HBME-1， TPO and combined markers in the diagnosis of thyroid cancer were high. While there was no statistical significance when compared with combined markers（P>0.05）. The sensitivity， accuracy and specificity of cytological examination combined with immunohistochemistry in diagnosis of thyroid nodules were significantly higher than cytology alone（P<0.05）. Conclusion Fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry can effectively improve the diagnostic accuracy of thyroid cancer， reduce the misdiagnosis and missed diagnosis of thyroid cancer and is beneficial to clinical treatment and prognosis.
[Key words] Cytology； Immunohistochemistry； Thyroid cancer； Preoperative diagnosis
甲状腺癌是甲状腺上皮细胞发生的恶性肿瘤，近年来甲状腺癌的发病率逐渐增加，已成为发病率增加最快的恶性肿瘤之一，严重危害人类的生命安全[1]。因此，提高甲状腺癌的早期诊断准确率、减少误诊与漏诊具有重要意义。本文观察分析细针穿刺细胞学检查联合免疫组化对甲状腺癌的术前诊断准确率的影响，以期为临床诊断提供参考依据，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2015年1月～2016年12月于我院就诊的86例甲状腺结节患者，患者术前均接受细胞学检查、免疫组化标记以及术后的病理诊断。其中男31例，女55例，年龄25～74岁，平均（38.78±8.17）岁，患者在术前均未接受过化疗、放疗与免疫治疗。本次研究均征得我院医学伦理委员会及患者的同意，并与患者签署知情同意书。
1.2 方法
患者取仰卧位，头仰伸，以充分暴露患者颈部，常规消毒铺巾后，局部麻醉，持7号针头穿刺针，在维持针头稳定的状态下快速穿刺数次，取得组织置于清洁玻璃片上，进行涂片[2]。
免疫组化标记：涂片脱水后采用TBS洗涤，分别标记鼠抗Galectin-3、鼠抗CK19、鼠抗BRAF、鼠抗HBME-1、鼠抗TPO，37℃下放置30 min，TBS洗涤，采用DAB显色15 min，测定细胞角蛋白（CK）-19、半乳糖凝集素（Galectin）-3、BRAF、HBME-1、TPO的免疫表达[3]。
细胞学检查：采用Wright stain染色细胞，涂片后采用0.5 mL刘A溶液染色30 s，滴加刘A液使用量的2倍在刘B液之上，使刘A液与刘B液充分混合，染色2 min，水洗干燥后进行镜检。
病理组织学观察：术中切去病理标本采用4%中性甲醇固定，采用石蜡包埋，将其制备成6 μm切片，采用苏木精-伊红染色后进行镜检。
1.3 观察指标
观察比较细胞学检查与联合免疫组化标准诊断甲状腺结节的敏感性、准确性、特异性。敏感性=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异性=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。以1-特异性为横向坐标，敏感性为纵向坐标构建ROC曲线，评价比较两种方法在甲状腺癌的术前诊断中的准确率。
1.4 统计学分析
采用SPSS22.0处理本文数据，计数资料以百分比表示，组间比较行χ2检验，P<0.05为差异有統计学意义。
2 结果
2.1 细胞学检查结合免疫组化标记与术后病理结果比较
术前细胞学诊断38例乳头状癌，18例滤泡性肿瘤，16例滤泡性病变，2例未分化癌。18例可疑恶性肿瘤患者采用免疫组化染色，其中7例乳头状癌，2例滤泡癌；术后病理结果：9例乳头癌，2例滤泡癌。16例可疑良性病变采用免疫组化染色，其中9例恶性肿瘤，术后病理结果得知，5例乳头癌，2例滤泡癌。术后病理检查得知，48例乳头癌，4例滤泡癌，9例未分化癌，25例结节性甲状腺肿。见封三图11～14。
2.2 免疫组化标记物诊断甲状腺癌的敏感性、准确性与特异性比较
单个免疫组化标记物抗体Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO与联合标记在甲状腺癌诊断中的敏感性、准确性、特异性均较高；但与联合标记对比差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.3 细胞学检查联合免疫组化标准诊断甲状腺结节的敏感性、准确性、特异性比较
细胞学检查联合免疫组化对诊断甲状腺结节的敏感性、准确性、特异性均显著高于细胞学检查（P<0.05）。见表2。
3 讨论
甲状腺结节有良恶性之分，良性结节为多发性结节，不会影响腺体的生理功能，也没有甲亢表现，可以使用药物进行治疗，恶性结节为单发性，容易出现癌变[4]。恶性的甲状腺结节以甲状腺癌为主，另外还包括甲状腺淋巴瘤、转移瘤等[5]。甲状腺结节诊断要点主要是甲状腺结节和甲状腺功能基本正常。T4正常或者稍低，但是T3可以略高以维持甲状腺功能正常，但是高峰时间很少提前出现，T3抑制试验呈可抑制反应[6，7]。血清高敏感性TSH浓度测定是评价甲状腺功能的最佳指标，血清TSH常正常[8]。
细胞学检查是一种微创、安全、并发症少、操作方便的检查手段，其诊断速度快且诊断准确性与可行度较高，是评估甲状腺结节性质的金标准，在甲状腺结节的定性诊断中广泛使用，但是甲状腺细胞病理诊断标准难以掌握，且操作技术与操作经验各有不同，且穿刺标本仅为可疑结节，对于一些不典型细胞，难以准确诊断，导致容易出现甲状腺癌的漏诊与误诊[9-11]。而手术治疗成功与否取决于诊断准确性的高低，所以提高甲状腺诊断准确性尤为重要。有研究结果表明，细胞学检查结合免疫组化标记能够有效提高诊断准确率[12]。Nakamura等[13]对乳腺癌患者临床可疑转移腋窝淋巴结采用CT或彩超引导下细针穿刺，发现细针穿刺活检的敏感度、特异度、阳性与阴性预测值和准确度分别为65%、99%、99%、80%和85%。霍雷军等[14]报道超声引导下细针穿刺细胞学检查判断乳腺癌腋窝淋巴结转移的敏感度为55.9%（19/34）、特异度为88.9%（8/9）、准确度为62.8%（27/43）、阳性预测值为95.0%（19/20）、阴性预测值为34.8%（8/23）。超声引导下细针穿刺是一种创伤小、操作简便的术前评估乳腺癌患者腋窝淋巴结状态的方式，然而如上所述其诊断的敏感性、特异性和准确度并不理想。超声造影利用注射造影剂后散射回声增强的特性，能够动态清晰显示病灶内直径<100 μm微血管的灌注循环情况，提高诊断的分辨力、敏感性和特异性。文献报道超声造影检查可以很好地补充常规超声检查的不足，明显提高超声检查鉴别乳腺癌良恶性腋窝淋巴结的效能[15]，同时超声造影技术还被报道可以有效地检测前哨淋巴通道和前哨淋巴结提高SLNB成功率[16]。Rautiainen等[17]报道超声造影引导下穿刺活检诊断乳腺癌患者腋窝淋巴结状态的敏感性66.7%，特异性100%，阳性预测值100%，阴性预测值93.8%，总准确率94.4%。本文研究结果，单个免疫组化标记物抗体Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO与联合标记在甲状腺癌诊断中的敏感性、准确性、特异性均较高；但与联合标记对比差异无统计学意义（P>0.05）；细胞学检查联合免疫组化对诊断甲状腺结节的敏感性、准确性、特异性均显著高于细胞学检查（P<0.05）；本文研究结果表明，各个免疫组化标记抗体诊断甲状腺癌的敏感性、特异性及准确性均较高，但与联合标记对比表达特性均无差异[18，19]。而细胞学检查结合免疫组化染色的敏感性、特异性、准确性均较单纯细胞学检查高，说明两种方法联合使用在甲状腺结节鉴别诊断中的价值较高[20，21]。
综上所述，细针穿刺细胞学检查联合免疫组化能够有效提高甲状腺癌诊断准确性，可有效减少甲状腺癌的误诊与漏诊，有利于临床治疗与预后。
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（收稿日期：2017-07-31）