[摘要] 目的 探讨FEZ1蛋白的表达与食管鳞癌的发生及食管鳞癌病理指标的关系。 方法 采用免疫组化SP法检测120例食管鳞癌及20例正常食管组织中FEZ1的表达情况，进一步分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。 结果 FEZ1 蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率（36.67%）显著低于正常食管组织（60.00%），并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与浸润深度及淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。 结论 FEZ1蛋白在食管鳞癌中低表达，并与浸润深度及淋巴结转移密切相关。
[关键词] 食管鳞状细胞癌；FEZ1；免疫组化
[中图分类号] R735.1 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2012）10-132-02
食管癌在我国发病率比较高，在我国恶性肿瘤死亡率中占第4位，也是世界上常见的十种恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。食管癌的癌变机制至今不是很清楚，近年来随着分子生物学的进展，已发现与食管癌的发生或演进有关的多个可能相关基因或相关的未知基因片段。近期很多资料也表明，亮氨酸拉链肿瘤抑制基因（fasciculation and elongation protein zeta-1，FEZ1）是抑癌基因，并且FEZ1基因的异常表达在人类多种肿瘤中均可检测到。本研究通过采用免疫组化法，分析FEZ1基因在食管鳞状细胞癌中的表达情况，探讨其在食管癌进展中所起的作用及与患者病理指标间的关系，为临床判断预后提供新的依据。
1 材料与方法
1.1 标本来源
120例标本均来自承德医学院附属医院病理科2007年1月~2009年12月手术切除食管鳞状细胞癌石蜡包埋标本，选取20例食管癌远端病理证实的正常黏膜。所有标本术前未经放疗、化疗及免疫治疗，均常规固定后规范取材，将患者的性别及年龄、肿瘤长度详细记录，有经验的病理医师通过双盲法进行复诊，镜检肿瘤组织学类型、浸润深度及淋巴结转移情况。将4 μm厚的相应的常规石蜡包埋组织制成的切片用于免疫组织化学染色。
1.2 资料分组
食管癌患者年龄划分为：年龄＜40岁4例、40~60岁93例、＞60岁23例；食管癌长度划分：肿瘤长径＜3 cm 45例，≥3 cm 75例；根据肿瘤病理的浸润深度分为早癌组5例、浅肌层及深肌层组21例，纤维膜及周围软组织组94例。
1.3 SP免疫组化染色
小鼠抗FEZ1单克隆抗体购自Cell signaling公司，采用免疫组化SP法，FEZ1单克隆抗体稀释倍数为 1︰50，实验步骤按说明书进行，DAB显色，苏木素复染，分化，返蓝，常规脱水、透明、中性树胶封片。PBS代替一抗作为阴性对照，已知肺癌阳性切片作为阳性对照。
1.4 结果判断标准
FEZ1结果评价，以细胞浆出现背景清晰的黄色或棕黄色颗粒为阳性。参照文献[1]， 在高倍视野下（400×）随机选取5个视野（每个视野观察不少于200个细胞），按阳性细胞所占的百分比及着色强度进行结果判定：按着色强度评分： 0分为无着色，1分为浅黄色，2分为黄色，3分为棕黄色；按阳性细胞数占同类细胞数的百分比评分：0分为阴性，1分为阳性细胞数10%，2分为11%~50%，3分为51%~75%，4分为＞75%。取两项评分的乘积作为总积分，0~3分为阴性，3分以上为阳性。
1.5 统计学处理
应用SPSS17.0统计软件包，蛋白表达与临床病理指标之间的关系采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
２ 结果
2.1 FEZ1蛋白在不同食管组织中的表达
FEZ1阳性表达可见于食管黏膜上皮及鳞癌细胞中胞浆内出现棕黄色颗粒，呈灶状或弥漫分布，大小不一，着色轻重不等。120例食管鳞癌中FEZ1阳性率为36.67%（44/120），明显低于正常食管黏膜60.00%（12/20），差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌组织中FEZ1阳性与阴性表达见图1、2。
2.2 FEZ1的表达与食管鳞癌临床病理参数的关系
鳞癌中早癌组、肌层组外膜组FEZ1蛋白的阳性率分别为80.00%、47.62%、31.91%，阳性率随浸润深度的增加呈降低趋势（P＜0.05）；实验结果显示淋巴结转移组FEZ1蛋白表达缺失，与无转移组差异明显；随着食管癌患者年龄的增长及肿瘤长度的增加，该蛋白表达亦呈降低趋势。见表1。
３ 讨论
食管癌是常见的消化道恶性肿瘤，食管癌发病机制及预后的相关性研究，亦是国内外研究的热点。Ishii[2]在8p22 的D8S261位点附近分离出FEZ1基因，研究证明，该基因在正常组织中表达较高，而在许多人类肿瘤中存在异常表达。原志庆等[3]发现甲状腺组织中FEZ1 蛋白和mRNA 的表达均显著高于甲状腺腺瘤和PTC 组织，Vecchione 等[4-5]检测了胃癌、膀胱移行细胞癌中FEZ1 蛋白的表达，结果发现所有的细胞系中几乎均不能检测到该蛋白的表达。本实验中120例食管鳞癌中FEZ1阳性率明显低于正常食管黏膜，差异有统计学意义（P＜0.05），与以上研究结果一致，提示FEZ1蛋白可能对食管鳞癌的发生、发展起抑制作用。本实验亦研究了FEZ1表达与食管癌临床指标之间的关系，表明其表达与浸润深度及淋巴结转移呈负相关，李娜等[6]研究发现食管癌中淋巴结转移组FEZ1 mRNA的阳性表达率和表达水平显著低于无淋巴结转移组。陈刚等[7]研究表明，肺癌中恶性度较高的小细胞癌中FEZ1表达水平明显高于低分化鳞状细胞癌，均与本实验结果一致。迄今为止，人们对FEZ1基因了解较少，一般认为在细胞周期中FEZ1通过cAMP 依赖激酶高磷酸化，阻滞细胞产生G2/M期，细胞的生长抑制，肿瘤的发生受到抑制。还与微管组分有关，通过S- G2/M期与P34cdc2的相互作用抑制生长，通过调节有丝分裂异常进而细胞生长失控。随着深入的对FEZ1基因和其他食管癌相关基因研究，从分子生物学水平阐明食管癌的发生发展机制，为食管癌的早期诊断和基因治疗提供理论依据和技术手段，具有一定帮助。
[参考文献]
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[3] 原志庆，陈晓磊，李娜，等.FEZ1基因在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义[J].重庆医科大学学报， 2011，36 （4）：437-439.
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[6] 李娜.FEZ1基因在食管鳞癌组织中的表达及其意义[J].中国现代医学杂志，2008，18（20）：2955-2957.
[7] 陈刚，王小玲，刘月平，等.FEZ1 Survivin 在肺小细胞癌及低分化鳞状细胞癌蛋白表达及其在凋亡中的作用[J].中国肿瘤临床，2007，34（21）：1209-1211.
（收稿日期：2012-04-05）